clinical pathology

ما هي العينات التي تؤخذ من الحيوانات لإجراء الفحوصات المخبرية ؟

الدم ( يجب أن يؤخذ في أنابيب تحوي على مانع التخثر المناسب في حال الحصول على البلاسما حتى لا يتخثر )
البول ( يضاف له المواد الحافظة في حال النقل لمسافات طويلة )
الفلورا ( في محتوى الكرش )
اللعاب
مفرزات الأنف والحنجرة
القشع ( يجب أن يؤخذ من الرئتين في الصباح الباكر ويزرع على منبت لوفن
شتاين هانسن بالبيض من أجل الكشف على العصيات المقاومة للحمض )
سوائل الجنب ، الحبن والتامور
سائل النخاع الشوكي
نقي العظام
البؤر القيحية
البراز



ما هي الشروط الواجب توفرها في العينة حتى نضمن نتائج مخبرية صحيحة ؟

يجب أن تكون أوعية جمع العينات نظيفة ومعقمة وتستخدم لمرة واحدة
يمكن استخدام الأوعية الزجاجية أكثر من مرة شريطة أن تكون نظيفة ومعقمة
ويجب أن تغسل بمادة حمض الكبريت ثنائي الكرومات Dicromate sulphuric acid
يجب إغلاق الأوعية بإحكام
يجب كتابة كل المعلومات على العينة كإعطاء رقم لها ونوعيتها ونوع التحليل
المطلوب ولمحة مختصرة عن الأعراض ( التشخيص السريري ) ونوع الحيوان وجنسه
واسم المزرعة والطبيب والتاريخ وعمر الحيوان
يجب تعقيم المناطق السطحية من جسم الحيوان التي يتم أخذ العينة منها بالكحول 70% + أيودين 2%
يجب أن تكون الأدوات وعبوات جمع العينة معقمة في الأوتوكلاف
تؤخذ العينات المراد فحصها من أجل الكشف عن الفطور على شرائح نظيفة للفحص
المجهري أو تؤخذ على مسحات من أجل الزرع على منبت سابورود Sabouraud
تؤخذ المسحة مباشرة من الجهاز التناسلي على شريحة نظيفة وتصبغ بصبغة غرام وتفحص مباشرة على المجهر



I جمع العينات الدموية : Collection of bllod
الوريد الوداجي Jiguler vein :
 هو شائع في الخيول ، الأبقار ، الأغنام ، الماعز والحيوانات الوحشية
الكبيرة . ويمكن أن يجمع الدم في الكلاب ، القطط ، الأرانب ، الجرذان ،
الفئران ، الهامستر وخنزير غينيا .
 ينصح به في الحيوانات الصغيرة إذا أردنا جمع كميات كبيرة من الدم
فالكلاب تكون في وضع الجلوس ثم توضع الكمامة ويرفع الرأس إلى الأعلى وإلى
الجانب بهدوء ويحسس الوريد في اليد اليسرى والمحقن باليد اليمنى
 يتم التخدير ويشق الجلد عند الوريد في الجرذان وخنزير غينيا والأرانب
 يجب أن توثق الحيوانات وتثبت
 يكون الوريد واضحاً عند تعقيم المنطقة بالكحول
الوريد الرأسي Cephalic vein :
 يستخدم في جمع العينات القليلة من الدم عند الكلاب
 يتم بالقبض على المنطقة الظهرية للوجه بمستوى الفك فيظهر الوريد الرأسي فوق مفصل الرسغ على الناحية الخارجية
الوريد الأذني Ear vein :
 يمكن استخدامه في القطط والكلاب الصغيرة ، الخنازير ، الأرانب ، خنزير غينيا والقرود
 يمكن اختيار الوريد الأذني على الحافة الظهرية لسطح للأذن
 حلق الشعر ومسح بالكحول أو الزايلول والضغط عليه بالإبهام الأيسر
ظفر إصبع القدم Toenail
 يستخدم عند صغار الكلاب ، خنزير غينيا وصغار الحيوانات الثديية
الذيل Tail
 يستخدم عند الخنازير ، الأغنام ، الأبقار ، الجرذان ، الفئران ، الهامستر والأسماك
 محقن مفرغ Veinpuncture
 يرفع الذيل للأعلى فيظهر الوريد العصعصي على الوجه البطني للفقرات العصعصية في ذيل الأبقار
 وضع الذيل في ماء دافئ عند الجرذان والفئران فيظهر الوريد بوضوح
 البتر Amputation
 عند الجرذان والفئران
القلب Heart
 يمكن استخدامه عند أي حيوان حتى عند الزواحف والأسماك والطيور للحصول على عينة الدم تحت تأثير المخدر
الأوعية الفخذية Femoral vein أو وريد الساق Saphenous vein أو وريد القصبة Tibial vein
 تستخدم عند الكلاب ، القطط ، صغار الثدييات والجرذان
 يمكن الحصول على كمية كبيرة من الدم في القرود من الوريد الفخذي .
وريد الضرع Mammary vein ( يستخدم خاصة في الأبقار الحلوب )
 يظهر الوريد على الناحية البطنية لغدة الضرع بمحاذاة الخط الأبيض متجهاً إلى الأمام ليدخل في جدار البطن
 يمكن استخدام الأنابيب المفرغة لجمع الدم كما هو الحال في الوريد الوداجي
الوريد الأجوف البطني Anterior vena cava ( يستخدم في الخنازير )
 يجب إدخال إبرة المحقن في الجلد بجانب الرغامى وباتجاه قاعدة الأذن
الضفيرة الوريدية خلف الحجاج Retroorbital venous plexus
 تستخدم عند الجرذان ، الفئران ، خنزير غينيا والهامستر
 الضفيرة متصلة بالأوعية الدموية المخية
 هي أفضل طريقة للحصول على كمية كبيرة من الدم عند الفئران
 يمكن إجراؤها تحت المخدر أو بدونه
وريد الجناح أو العرف Wing vein or comb
 يستخدم عند الطيور
 يظهر تحت ريش الإبط وعلى طول السطح البطني لعظمة العضد


II أوعية جمع الدم Containers
تعتمد على كمية الدم المطلوبة ( من أجل جمع المصل أو البلاسما ) ويجب أن يكون الوعاء نظيفاً من الناحية الكيميائية وجافاً
من أجل جمع الدم الكلي دون أن يتخثر يجب أن يكون الوعاء زجاجي ومزود بغطاء مطاطي ويحوي على مانع تخثر
وعاء مفرغ من الهواء Vacutainers
 متوفر بجميع القياسات 2 - 50 مل بدون مانع تخثر أو معه
 طريقة الحصول على الدم كما هو موضح بالشكل
 هناك أنواع مختلفة من الأنابيب المفرغة من الهواء
 تحذيرات عند استعمال الأنابيب المفرغة من الهواء




التبدلات الناجمة عن استخدام موانع التخثر Alterations caused by coagulantes
 EDTA
 يسبب استخدام أكثر من 2 مغ من EDTA ل 1 مل من الدم انكماش الخلايا
الدموية الحمراء مما يؤدي إلى انخفاض تركيز ال PCV وال MCV وارتفاع تركيز
ال MCH
 استخدام ا مغ EDTA إلى 1 مل من الدم يمكن أن يرفع حجم ال NPN بزيــــادة 7 مع/ دل
 لا يمكن استخدامه في تحليل الفوسفاتيز القلوي لأنه يمكن أن يتداخل مع تطور اللون
 يخفض تركيز ثاني أوكسيد الكربون في عينة الدم
 يمكن أن يؤثر على تحليل الكرياتينين
 يخفض PH الدم
 HEPARIN
 ضعيف عند استخدامه في دراسة الخلايا الدموية ، يمكن أن يخثر الكريات البيضاء إضافة لتداخله في صباغتها
 جيد عند استخدامه من أجل دراسة PH الدم
 أملاح الصوديوم أو البوتاسيوم الموجودة في الهيبارين تؤثر على تحليل الشوارد وعلى البولة في الدم
 يمكن أن يرفع الفوسفور غير العضوي في العينة الدموية
 لا يستخدم في حالة قياس أمونيا الدم
 لا يستخدم في حالة قياس بعض أنزيمات الدم مثل ال LDH
 AMMONIUM OXALATE & SODIUM CITRATE
 تخفض PH الدم في العينة
 SODIUM & POTASSIUM OXALATE
 ترفع PH الدم في العينة
 POTASSIUM OXALATE
 ينتج عن استخدامه انكماش الخلايا الدموية الحمراء الذي يؤدي بدوره إلى انخفاض في تركيز البلاسما وغير ملائم لقياس ال PCV
 يثبط الأنزيمات LDH , Amylase , Al.pho. & Ac.pho.
 غير ملائمة لتحديد الصوديوم ، البوتاسيوم والكالسيوم
 استخدامه يؤدي إلى خفض تركيز حمض البول في العينة الدموية
 FLUORIDE
 يستخدم كحافظ لتركيز الغلوكوز في البلاسما ، كما يشاهد انحلال دموي عند استخدامه وقد يخفض 10% من تركيز الغلوكوز
 أيونات الفلوريد غير ملائمة لتحديد ال BUN في العينة الدموية لأنها تعتمد على نشاط أنزيم اليوريز
 تثبط أنزيمي الفوسفاتيز القلوي والحامضي
 ينشط الأميلاز بوجود الكلوريد والفلوريد
 لا يمكن استخدامه كحافظ في حالة تحديد تركيز حمض البول في العينة الدموية



V حدوث الأخطاء الشائعة عند جمع العينات الدموية Errors commonly made in the collection of blood

التحلل الدموي
 محقن رطب
 استخدام موانع التخثر في التحليل الكيميائي للدم
 يظهر المصل على أنه متحلل في حال ارتفاع الخضاب أو احتوائه على الصفراء
 يمكن أن يتدخل تحلل الدم في الاختبارات التالية :
 ليباز المصل
 بيليروبين المصل
 صفراء الدم
 بولة الدم
 الفوسفات غير العضوي
 بولة الدم
 بوتاسيوم المصل
 الفوسفاتيز القلوي والحمضي
 أنزيمات الترانس أميناز GOT & GPT
 أنزيم ال LDH
 PH الدم
 كلور الدم
 البروثرومبين
تشحم الدم
 يمكن أن تظهر الشحوم في الدم إذا لم يكن المريض صائماً قبل أخذ العينة وتؤدي إلى نتائج خاطئة في الحالات التالية
 البروتين الكلي
 الترانس أميناز
 الخضاب
 الصفراء
 الأميلاز
 الشحوم الثلاثية والكوليسترول
لا تضع عينة الدم في الثلاجة فوراً قبل أن يتخثر كاملاً عندما يكون المصل
هو المطلوب ، ثم افصل المصل عن الكتلة المتخثرة ( المنكمشة )
تحدث الخثرة الفيبرينية عند التثفيل الفوري أو إذا كانت سرعة المثفلة عالية
يجب أخذ العينة الدموية عندما يكون الحيوان في وضع الراحة
يمكن أن يتخثر الدم لعدة أسباب :
 أخذ فترة طويلة في سحب الدم
 تأخير مزج الدم مع عامل التخثر
طول الفترة الزمنية بين سحب الدم وإجراء التحاليل
احتواء الأنبوب على تركيز عالي من محلول مانع التخثر


VI الحفاظ على المحتوى الدموي Stability

من الضروري توفر المعلومات عند الطبيب حول الحفاظ على محتويات الدم
وأفضل طريقة لسحبه وتخزينه قبل التحليل لمنع الأخطاء في النتائج وتحليلها
، لأن عينات الدم أو المصل غالباً ما ترسل لمسافات بعيدة حتى تصل إلى
المختبر ، أو تبقى في المختبر لمدة طويلة حتى يحين موعد تحليلها .
 يمكن ثبات القيم الكيميائية في مصل دم الكلاب المبرد أو المفرز لفترة تصل حتى 6 أسابيع
 الثبات الجيد للتحاليل التالية : البولة ، البروتين الكلي ، الرحلان
الكهربائي للبروتين ، كولستيرول ، كالسيوم ، الفوسفور غير العضوي والكلوريد
 عدم الثبات للتحليل التالية : يتخرب الغلوكوز في حالة تبريد أو تفريز العينة الدموية
 ثبات المكونات الدموية في بلاسما دم الإنسان المفرزة والمبردة لمدة 6 أشهر
 الثبات الجيد للألبومين ، الغلوبيولين ، البروتين الكلي ، الرحلان
الكهربائي للبروتين ، الكولستيرول ، البولة ، حمض البول ، الكرياتينين ،
البيليروبين والكلوريد
 غير ثابت في حالة فحص الغلوكوز
 غير ثابت في حالة تحليل الآزوت غير البروتيني
 يمكن التقصي عن إمكانية ثبات الأنزيمات لكن النتائج متفاوتة بشكل كبير .
يظهر العديد من الباحثين عدم ثبات كبير للأنزيمات بينما يظهر البعض ثباتاً
واضحاً وقوياً وسبب هذا الاختلاف ما يلي :
 اختلاف الأنواع
 العلاج قبل التحليل
 طرق التحليل
 التغيرات في تحليل النتائج مما يؤدي إلى التفاوت فيما بينها
 وجود اختلاف كبير في القيم الطبيعية لكيميائية المصل بين أنواع الكائنات الحية
 غلوكوز الدم
 عندما يترك مصل الدم على درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة فإن قيمة غلوكوز مصل الدم تنقص في حدود 7%
 إذا فصل مصل الدم خلال نصف ساعة من سحب الدم ووضع في الثلاجة أو الفريزر
يمكن أن تثبت القيمة لعدة أيام . هذه الخاصية غير موجودة في دم الكلاب
 البيليروبين
 في حال تعرض مصل الدم لضوء الشمس المباشر تنقص قيمة البيليروبين في المصل إلى 50% خلال ساعة واحدة
 إذا وضع المصل في الثلاجة لمدة 12 ساعة فإن النقص يكون قليلاً
 الفوسفور والبوتاسيوم غير العضوي
 يجب فصل المصل عن الخثرة الدموية في الأنبوب بسرعة حتى نحافظ على القيمة الصحيحة
 في حالة تحلل الدم يرتفع الفوسفور غير العضوي
 الكولستيرول
 ثابت لمدة خمسة أيام على درجة حرارة الغرفة
 حموضة الدم PH
 إذا تعرض الدم للهواء فإن ال PH يرتفع بسرعة نتيجة لفقدان ثاني أوكسيد الكربون


I جمع عينات البول :

تجمع عينات البول إما في وسط حامضي أو قلوي
يعتمد ثبات بعض المكونات على درجة ال PH
يشكل تلوث البول بالجراثيم مشكلة إذا تم نقله بواسطة الشحن
من المواد الحافظة :
 حمض البوريك
 كلوروفورم
 فورم ألدهيد
 تولووين
تعتمد درجة حرارة تخزين البول على نوع التحليل
عادة ما يجمع بول 24 ساعة في مختلف ساعات النهار لاستخلاص العديد من المواد ولإجراء العديد من التحاليل
يتم تحليل الكالسيوم في وسط حمضي لأنه يمنع تشكل أملاح الكالسيوم غير
المنحلة والذي يؤدي إلى نتائج منخفضة . كم يمكن تقسيم العينة إلى قسمين
أحدهما مع الحمض والثاني بدون حمض


I جمع عينات الفلورا Flora samples

تؤخذ عينات الفلورا من أجل الفحص الجرثومي
تتأثر بطريقة الجمع
يجب أن تجمع من المنطقة المتوقعة الإصابة
منع تلوث العينات
يجب إرسال العينات إلى المختبر بالسرعة القصوى وعلى أوساط النقل لمنع التجرثم








__________________